Manual de Porcicultura
6.8 Protocolo para la extracción y procesamiento del semen porcino.
1. Se debe tener el diluente listo a 32-36 °C antes de la recolección.
2. Los termos, pipetas, cubres y porta objetos deben estar a 37 °C.
3. Se debe alistar los termos de la siguiente forma:
a. El termo debe estar esterilizado y seco.
b. De no estar seco se debe enjuagar con diluente.
c. Se debe poner en la boca una gaza doble sino se utiliza la U.S. bag (nueva
tecnología).
d. Se debe cubrir la boca del termo una vez que esté listo para evitar
contaminación.
4. Se pone al verraco en la sala de recolecta con el maniquí los cuales tienen que
estar limpios en donde el verraco debe estimularse.
5. El operador se pone un guante de látex (sin talco) y un guante de plástico sobre
éste.
6. Al saltar el verraco al maniquí, el operador exprime el prepucio evacuando todo
el contenido de la bolsa prepucial, el verraco debe tener los pelos prepuciales
recortados para evitar traumatismos en el pene.
7. El operador se quita el guante y procede a tomar el pene del animal en forma
firme y dejando el orificio uretral libre.
8. Bota la primera porción.
9. Recoge la segunda porción (fase rica) y líquido prostático si el semen se usara
solo en los próximos dos días.
10. Si se pretende utilizar semen por más largo tiempo se debe recoger solo la fase
rica.
11. El verraco debe evacuar sus cuatro fases completas.
12. Una vez recogido el semen se lleva al laboratorio lo más rápido posible.
13. En el laboratorio se lleva a cabo el siguiente procedimiento:
a. Se le quita al termo la gaza o se le arranca el filtro a la U.S. bag.
b. Se coge con una pipeta de Pasteur una muestra de semen nativo y se observa
al microscopio todo a 37°C para juzgar su motilidad, esta debe ser superior
al 85%.
c. Se toma otra muestra para determinar cantidad de espermatozoides presentes
en el eyaculado.
d. Se pesa todo el eyaculado preferiblemente o se mide en cc.
e. Se diluye el eyaculado 1:1 con el diluente el cual debe tener una temperatura
de entre 32-34°C.
f. Se procede a hacer los cálculos para determinar las porciones que se van
a realizar utilizando el espectrofotómetro o bien la cámara de Neubayer, o
bien el espermiodensímetro de Karras. * Ver instrucciones para su uso
g. La dosis a utilizar serán de 3 – 4 x 109 espermatozoides por dosis.
h. Se termina de ajustar la cantidad de diluente necesaria para esta dilución.
i. El diluente no debe golpear el semen debe bajar por las paredes del beaker
o bolsa.
j. Se procede a la evaporación de las dosis con un volumen de entre 80 a 100
ml por dosis.
k. Se evalúa al microscopio de nuevo la motilidad de la muestra con todo el
material a utilizarse en el microscopio a 37°C.
l. Se aclimatan las dosis a una temperatura de 20°C por 2 horas. A esta
temperatura debe estar el laboratorio.
m. Luego de estas 2 horas se almacenan las dosis a una temperatura de 16°C.
n. Dos veces al día se deben resuspender las dosis con movimientos suaves.
o. Nunca debe salir del laboratorio de I.A. una dosis de semen sin verla al
microscopio para juzgar su motilidad.
Fuente: 634,4
P123m Padilla Pérez, Manuel
Manual de Porcicultura / Manuel Padilla
Pérez. – San José, Costa Rica: MAG, 2007.
73 p.; 22 cm.
ISBN 978-9968-877-24-4
CERDOS. COSTA RICA. 3. CULTIVO.
I. Ministerio de Agricultura y Ganadería.
II. Título